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【生命科学コース】研究室活動の紹介(3)-金岡研究室(植物分子遺伝学)

  生命科学コースの研究室紹介、第3回目となる今回は植物分子遺伝学研究室(金岡研究室)になります。

 植物分子遺伝学研究室(金岡研究室)では、シロイヌナズナ、トマト、ウキクサなどの植物を用いて、生殖や発生に関わる分子メカニズムを調べています。今年度は、研究員が1名、修士2年生が1名、学部4年生が5名、学部3年生が5名、所属しています。今回は研究の様子を簡単に紹介します。

 研究室の活動内容についてより詳しく知りたい方は、研究室HPをご覧下さい。また、研究室に興味のある学部生、大学院進学希望者(他大学含む)の研究室訪問も随時受け付けておりますので、メールで澳门皇冠下さい。

 

 最初に紹介するのは、遺伝子のクローニングやコンストラクトの作成の様子です。植物の研究をするといっても、植物だけを扱うわけではありません。遺伝子の機能を調べるために蛍光マーカーと融合させた人工遺伝子を作成して植物に導入して観察したりもします。そのためのコンストラクトを、PCRの手法や大腸菌を用いて作成します。

 専用のコンピューターアプリケーションを使って、自分が合成したいコンストラクトの設計図を作成します。

コンピューター解析

設計図ができたら、そのデザインに従って、PCR法により目的の遺伝子を増やします。ここではPCRの試料を調製しています。

サンプル調整

調整した試料をPCR機(サーマルサイクラー)にセットします。数時間で特定のDNA断片が数百万倍に増幅されます。

PCR開始

PCRの待ち時間には電気泳動用のゲルを作成します。まず、メスシリンダーを使って、バッファーを測ります。

バッファー計量

アガロースゲルは電子天秤で量ります。

アガロース計量

電子レンジでアガロースを溶かします。熱いので突沸に注意して、慎重に作業します。

アガロース融解

冷めたゲルは専用のトレーに入れて固めます。

ゲル作成

電気泳動槽にゲルを入れ、PCR産物を入れて電気泳動します。

電気泳動開始

目的のDNAが増えていたら、ゲルからその場所を切り出します。

ゲルからDNA回収

切り出したゲルからDNAを抽出するために、ゲルをヒートブロックで加熱して溶かします。

ヒートブロックでゲル融解

遠心分離機で遠心してDNAを回収します。

遠心分離

微量分光光度計を用いて、回収したDNAの濃度や純度を測定します。

DNA濃度測定

増幅したDNAと、あらかじめ用意しておいたプラスミドDNAを連結させて、新しいコンストラクトを作ります。コンストラクトを大腸菌に入れ、選抜のための薬剤が入った培地に播きます。

ライゲーションと形質転換

大腸菌はインキュベーターで一晩培養します。

大腸菌の培養

翌日には培地に大腸菌のコロニーが生えてきます。これらのコロニーからプラスミドDN